叉头状转录因子O1基因过表达慢病毒载体构建及其大鼠系膜细胞株的建立

目的构建含组成性激活突变型Fox O(CA-Fox O1 1)基因的过表达慢病毒载体,并建立其过表达的大鼠肾小球系膜细胞株。方法通过四质粒合成法构建包含CA-Fox O1编码序列的过表达慢病毒载体(LV-CA-Fox O1)。实验分为3组:空白对照组(NC组)、空慢病毒载体阴性对照组(LV-empty-Fox O1组)和过表达慢病毒载体组(LV-CA-Fox O1组)。培养系膜细胞(RMCs)72 h后,用流式细胞仪检测RMCs中绿色荧光蛋白(GFP)阳性率,并采用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测Fox O1的m RNA及蛋白表达情况。结果成功构建LV-CA-Fox O1,其病毒滴度为1×108TU/ml。LV-empty-Fox O1组和LV-CA-Fox O1组GFP阳性率分别为84.5%和81.4%;与NC组相比,LV-CA-Fox O1组Fox O1的m RNA与蛋白表达量相当于NC组的27.92倍与5.41倍(均P<0.05);而NC组与LV-empty-Fox O1组Fox O1的m RNA及蛋白表达量差异均无统计学意义。结论成功构建了大鼠Fox O1基因的过表达慢病毒载体,并建立了稳定过表达Fox O1的大鼠肾小球系膜细胞株,为进一步研究Fox O1的功能和作用机制奠定了研究基础。     

柴可群三阶段辨治大肠癌经验

柴可群主任中医师认为,大肠癌是在人体正气不足的基础上,外邪乘虚入侵,复因饮食、情志所伤,使脏腑功能失调,气血津液运行失常,产生气滞、血瘀、痰凝、湿浊、热毒等病理变化,蕴结于肠腑,相互搏结,日久积渐而成;是一种以正气虚损为本,局部实邪结聚为标,本虚标实的病证。正气亏虚、癌毒内蕴是大肠癌的基本病机,同时也是大肠癌复发转移的根本原因。治疗原则为"扶正为本,祛邪有度,全程调神,随证而治"。具体根据根治阶段、随访阶段、姑息治疗阶段中正邪盛衰的主次和疾病发生发展的特点,及时调整用药,并强调在该病临床各期均需要结合中医药的治疗,进行全程管理。     

NRG-1参与髓鞘再生及修复的研究进展

<正>神经调节蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)是一类含有表皮生长因子样结构域的营养因子,其主要存在于神经组织,尤其是在神经元中含量丰富,集中在神经元的轴突、突触前膜和生长锥,胞体中含量较少。NRG-1也存在于神经胶质细胞,与突触可塑性、神经生长和再生密切相关。近年的研究表明,NRG-1对神经损伤后髓鞘的再生及修复发挥着重要的作用。本文主要对近年来NRG-1参与髓鞘再生及修复的研究进展作一综述。1 NRG-1及其ErbB受体信号通路1.1 NRG-1家族成员NRG是由NRG基因编码产物经选     

间充质干细胞中相关的miRNA研究进展

<正>间充质干细胞(mesenchyrnal stem cells,MSC)是一种成体干细胞,具有无限扩增及多向分化能力,取样方便、低免疫原性及无伦理争议而成为再生医学中备受关注的明星细胞,已投入临床前研究多年,在动物模型中也取得较好的再生、肿瘤治疗效果,尤其骨髓来源MSC在治疗骨相关疾病取得良好疗效。而其     

虾青素抑制氧化应激改善陈旧红细胞保存质量

目的:观察虾青素能否抑制陈旧悬浮红细胞内的氧化应激,改善红细胞保存质量。方法:采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,将其随机分为4组,对照组加入DMSO,另外3组悬浮红细胞的保存液内加入抗氧化剂虾青素使其终浓度分别为5、10和20μmol/L,悬浮红细胞于2℃~6℃内保存。保存至28 d、42 d采用倒置荧光显微镜观察悬浮红细胞内活性氧族的表达状况,采用荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族的含量,采用硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内丙二醛含量,扫描电镜观察红细胞的超微结构,采用化学比色法测定三磷酸腺苷含量,采用紫外测试法测定2,3-二磷酸甘油酸含量。结果:与各自对照组相比,加虾青素的三组储存28 d和42 d悬浮红细胞内活性氧族和丙二醛含量降低,三磷酸腺苷和2,3-二磷酸甘油酸水平升高,改善了红细胞的形态。结论:虾青素可以通过降低储存悬浮红细胞内的氧化应激水平改善红细胞保存质量。     

Wnt/β-catenin信号通路对孤独症模型大鼠重复呆板样行为的影响

目的　探讨Wnt/β-catenin信号通路对孤独症发生过程中重复呆板样行为的影响。 方法　利用丙戊酸（valproic acid,VPA）孤独症动物模型,检测了经典Wnt信号通路关键信号分子β-catenin及其负性调节因子GSK-3β在孤独症模型大鼠小脑脑区的表达变化;同时检测孤独症模型大鼠重复呆板样行为变化。Western blotting法检测GSK-3β、β-catenin总蛋白及磷酸化蛋白表达,运用旷场实验检测重复呆板样行为持续的时间、次数。 结果　与对照组相比,在小脑脑区模型组GSK-3β磷酸化蛋白表达增加,β-catenin磷酸化蛋白表达减少;重复呆板样行为持续的时间、次数均增加。 结论　孤独症大鼠小脑脑区经典wnt信号通路活性增加,运动亢进,提示经典Wnt信号通路活性增加可能导致重复呆板样行为变化,进而导致对孤独症的易感性增加。     

前连合及内囊断层解剖与MRI图像初步对照研究

目的探讨内囊与其毗邻结构的断层形态学特征、内囊前肢与前连合之间的空间定位,及其与MRI断层影像的对应关系,为中枢神经系统研究、脑深部刺激治疗精神神经方面的疾病提供可靠的断层解剖学依据。方法利用MRI技术对100例健康成年女性的脑部进行扫描,选取经福尔马林固定的成年女性尸体大脑标本12例,然后经火棉胶包埋技术制成厚为500μm的薄层连续切片,并与MRI图像进行对照研究。结果断层切片可详细阐明内囊及其毗邻结构在不同方位上形态特征,MRI图像不能清晰地辨认内囊与其毗邻结构边界,水平位、冠状位上可观察到前连合连接双侧内囊前肢。结论脑断层解剖切片较MRI图像更能清晰地显示内囊及其毗邻结构的位置关系,为脑深部电刺激内囊治疗某些精神神经疾病提供断层解剖学应用价值。     

SD大鼠视网膜微动脉平滑肌细胞分离和消化方法

目的:探讨分离、消化SD大鼠视网膜微动脉平滑肌细胞(RMASMCs)的方法。方法:取正常SD大鼠眼球,分离视网膜微动脉,利用不同消化酶消化不同时间后,分离RMASMCs,在倒置显微镜下观察RMASMCs形态,并行免疫组化法鉴定。结果:解剖显微镜下成功急性分离视网膜动脉分支,即视网膜微动脉(直径40.23±5.61μm)。1、2、3号消化酶各消化10-16min,RMASMCs数量逐步增多,16min时最多(13.4±1.3个/低倍视野),与其它消化时间相比,差异有统计学意义(P0.05)。倒置显微镜下观察收获的RMASMCs呈长梭形、细胞膜完整、边缘光滑;免疫组化染色鉴定其胞浆呈α-action阳性表达。结论:采用急性分离、逐步消化的方法能成功获取较多数量和较高质量的RMASMCs。     

深圳市第二人民医院就诊甲状腺癌患者发病相关因素研究

目的 调查深圳市第二人民医院就诊的甲状腺癌患者的患病特点,分析并找出与甲状腺癌发病率相关的潜在危险因子.明确甲状腺癌与碘营养之间的相关性,为合理的碘摄入以及甲状腺癌的防治工作提供科学依据.方法 采取连续收录与分层抽样的方法,收集2013年2月至2014年12月于深圳市第二人民医院核医学科甲状腺病门诊就诊的甲状腺癌患者123例,结节性甲状腺肿组患者150例及正常对照组102例;测定尿碘含量;采集血样检测甲状腺功能;并完成相关的情绪压力、焦虑及生活方式等问卷调查.结果 患者婚姻状态、教育程度、居住地区、情绪焦虑评分、T4、TSH 6个变量有统计学意义(P＜0.05),提示这6个变量可能与甲状腺癌患病相关;患者血脂高(高脂血症)、BMI体重指数与甲癌可能有相关,相关性接近有统计学差异;而患者尿碘浓度与甲癌患病显示无显著相关性(P=1.65).结论 本研究中收录的患者甲状腺癌的发生率与尿碘水平无明显相关性;而与患者肥胖、婚姻状况等生活方式因素以及情绪焦虑相关.     

泮托拉唑在急性重度有机磷农药中毒治疗中的作用分析

目的分析观察泮托拉唑(Pantoprazole)在急性重度有机磷农药中毒治疗中的作用及临床应用价值。方法对临床64例急性重度有机磷农药中毒的患者,随机分为治疗组及对照组,每组32例。对照组给予长托宁、氯解磷定等常规药物治疗,治疗组在对照组用药基础上加用泮托拉唑,比较两组在治疗过程中上消化道出血的发病率。结果治疗组32例,发生上消化道出血9例;对照组32例,发生上消化道出血24例.两组均无死亡病例。治疗组的效果明显,疗效确切,比较对照组,差异具有显著性(P<0.05)。结论急性重度有机磷农药中毒治疗中加用泮托拉唑,可以有效防止出现上消化道出血,且效果确切,临床应用价值高。